最簡單的紫外可見分光光度計為單光束光學系統(tǒng),來自單色器的光穿過樣品后到達檢測器。這種簡單的設(shè)計意味著所用的光學部件較少,可減小儀器尺寸并降低成本。
不過,在正式測量樣品前必須測量基線或空白樣品。在液體樣品測量中,基線讀數(shù)代表樣品池和所用溶劑的吸光度。使用單光束系統(tǒng)時,基線和樣品需要分開單獨測量。這意味著,如果兩次測量之間光強度或系統(tǒng)光學性能發(fā)生任何變化,就會影響到測量的準確性。對于耗時較長或空白易隨時間發(fā)生變化的樣品測量來說,準確性是一大問題。實際上這也意味著使用單光束系統(tǒng)進行測量時,在測量過程中應(yīng)經(jīng)常進行基線/空白測量。
很多分光光度計使用雙光束光學配置,來自單色器的光被分為兩束:參比光束和樣品光束。通常使用光學元件(如具有鏡面的旋轉(zhuǎn)輪或者稱為分束器的半鍍銀鏡)進行分光。每束光均通過獨立光路進入樣品室。由于擁有兩束相同波長的光,因此可以同時測量參比/空白和樣品。這意味著樣品測量可以實時校正任何儀器波動。這種實時校正可確保高度準確的測量結(jié)果。
具有兩個檢測器的雙光束光學系統(tǒng)示意圖
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